制藥行業(yè)小微樣品澄清度的測(cè)定

???作者：肖時(shí)俊

1、背景

年國(guó)家藥典委員會(huì)（原名衛(wèi)生部藥典委員會(huì)成立于1950年）根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥品管理法》的規(guī)定，負(fù)責(zé)組織編纂《中華人民共和國(guó)藥典》及制定、修訂國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)，是法定的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)，由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)頒布實(shí)施。新藥典中發(fā)布了對(duì)于藥品澄清度的檢測(cè)要求，它將澄清度由清到濁規(guī)定了0.5-4（見(jiàn)表1）5個(gè)澄清度級(jí)號(hào)。

這個(gè)指標(biāo)實(shí)際上是檢測(cè)了藥品中雜質(zhì)的情況，是衡量藥品質(zhì)量的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，因此規(guī)定了藥品必須達(dá)到某一個(gè)級(jí)別才能作為合格藥品。這個(gè)指標(biāo)并不僅僅限于溶液藥品，固體藥品同樣也會(huì)有澄清度要求，它通過(guò)將固體藥品溶解于特定溶液后檢查其澄清度，從而確定藥品質(zhì)量。例如常用的鎮(zhèn)靜劑和治療失眠藥片佐匹克隆片，藥典規(guī)定其澄清度不得高于2號(hào)濁度標(biāo)夜。

事實(shí)上，澄清度這個(gè)指標(biāo)是最常見(jiàn)的幾個(gè)藥品不合格項(xiàng)目之一，由于澄清度不合格而導(dǎo)致問(wèn)題也時(shí)常見(jiàn)諸于報(bào)端。因此如果生產(chǎn)的藥品有澄清度要求，藥廠QC部門(mén)一定會(huì)檢測(cè)這個(gè)指標(biāo)。藥典規(guī)定了兩種檢測(cè)方法。一種方法為目視比濁法，即預(yù)先配制好5個(gè)級(jí)號(hào)的濁度標(biāo)液，然后在一定光線下進(jìn)行觀測(cè)，但是存在兩個(gè)問(wèn)題，一是不同日期的樣品澄清度沒(méi)有量化的數(shù)據(jù)；二是因每個(gè)化驗(yàn)人員的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)不一，當(dāng)需要換班組分析，樣品5個(gè)級(jí)號(hào)的濁度標(biāo)液的濁度值（范圍大概是0-40NTU），然后再檢測(cè)藥品的濁度值，即可得到藥品的澄清度級(jí)號(hào)。這個(gè)方法簡(jiǎn)單而準(zhǔn)確，也消除了人為誤差。HACH公司的2100N和2100AN兩款濁度儀，在這方面可以完全滿足采用儀器法確定藥品澄清度的要求。

但是在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，哈希公司的工程師發(fā)現(xiàn)由于大多數(shù)藥品價(jià)格昂貴，用戶采集的檢測(cè)樣品量較少，而2100N和2100AN濁度儀一次測(cè)試需要約30mL的樣品量，用戶希望盡可能的減少測(cè)試用的最小樣品量。鑒于此，哈希的工程師利用2100N和2100AN濁度儀，開(kāi)發(fā)了可以應(yīng)用于制藥行業(yè)小微樣品濁度測(cè)試的方法，僅需要2.5mL的樣品量，即可確定藥品的澄清度。該方法也可用于其它有小微樣品濁度測(cè)試需求的行業(yè)。

2、HACH解決方案

哈希公司的應(yīng)用工程師根據(jù)藥典中澄清度標(biāo)液的配置方法（見(jiàn)附錄Ⅸ B），逐級(jí)稀釋配置藥典階梯樣0.5-4號(hào)標(biāo)液，利用哈希2100系列濁度儀，通過(guò)配置梯度濁度標(biāo)液自建工作曲線，得到樣品的濁度測(cè)定值與理論值有良好的線性關(guān)系。

a)利用濁度儀制作的工作曲線來(lái)標(biāo)定藥典澄清度標(biāo)液，標(biāo)定結(jié)果如下：

b)利用該曲線進(jìn)行樣品的測(cè)定，換算為澄清度級(jí)號(hào)來(lái)判斷藥品是否合格。

以某藥企為例，用戶待測(cè)藥品為腫瘤單抗新藥，市場(chǎng)售價(jià)每毫升超萬(wàn)元，檢測(cè)成本高昂。哈希公司提供的解決方案，每次檢測(cè)僅需2.5 ml，大大節(jié)省用戶質(zhì)檢成本。該藥品藥典要求澄清度級(jí)號(hào)為3號(hào)（18.4 NTU），實(shí)測(cè)結(jié)果濁度值為15.4 NTU，低于藥典要求，證明該藥品合格。

溶液澄清度

中國(guó)藥典：

附錄Ⅸ B澄清度檢查法

本法系在室溫條件下，將用水稀釋至一定濃度的供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液分別置于配對(duì)的比濁用玻璃管(內(nèi)徑 15 – 16 mm，平底，具塞，以無(wú)色、透明、中性硬質(zhì)玻璃制成)中，在濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備5分鐘左右后，在暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下，照度為1000 lx，從水平方向觀察、比較；用以檢查溶液的澄清度或其渾濁程度。除另有規(guī)定外，供試品溶解后應(yīng)立即檢視。 品種項(xiàng)下規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過(guò) 0.5 號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液。“幾乎澄清”則指供試品溶液的濁度介于0.5號(hào)至1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度之間。
濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備 稱(chēng)取于105 ℃干燥至恒重的硫酸肼1.00 g，置100 mL量瓶中，加水適量使溶解，必要時(shí)可在 40 ℃的水浴中溫?zé)崛芙?，并用水稀釋至刻度，搖勻，放置 4 – 6 小時(shí)；取此溶液與等容量的 10%烏洛托品溶液混合，搖勻，于 25 ℃避光靜置24小時(shí)，即得。本液置冷處避光保存，可在兩個(gè)月內(nèi)使用，用前搖勻。
濁度標(biāo)準(zhǔn)原液的制備 取濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液 15.0 mL，置 1000 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，取適量，置1 cm吸收池中，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄Ⅳ A)，在550 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，其吸光度應(yīng)在0.12 – 0.15范圍內(nèi)。本液應(yīng)在48小時(shí)內(nèi)使用，用前搖勻。
濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備 取濁度標(biāo)準(zhǔn)原液與水，按下表配制，即得。本液應(yīng)臨用時(shí)制備，使用前充分搖勻。